Beurteilende(r)| Name: | Ao.Univ.Prof. Dipl.-Ing. Dr.nat.techn. Lukas Mach |
| Herkunftsbetrieb: | |
| Arbeit |
| Typ der Arbeit: | Masterarbeit |
| Sprache der Arbeit: | Englisch |
| Titel der Arbeit in Originalsprache: | "Establishment of an in vitro co-culture system for the investigation of tumor-stroma interactions in NPM-ALK driven lymphomas" |
| Titel der Arbeit in deutsch: | Etablierung eines in vitro Ko-Kultivierungssystems für die Untersuchung von Tumor-Stroma Interaktionen in NPM-ALK abhängigen Lymphomen |
| Titel der Arbeit in englisch: | "Establishment of an in vitro co-culture system for the investigation of tumor-stroma interactions in NPM-ALK driven lymphomas" |
| Publikationsmonat: | 11.2014 |
| Seitenanzahl: | 68 |
| Online-Katalog der Universitätsbibliothek Bodenkultur |
| AC-Nummer: | AC12137081 |
| Abstract |
| Abstract in Deutsch: | Das systemische anaplastische großzellige Lymphom (ALCL) ist eine aggressive Form des Non-Hodgkin-Lymphoms, das gehäuft im Kindes- und Jugendalter auftritt. In mehr als der Hälfte der Fälle kann eine Translokation der Chromosomen gefunden werden, was zur Formierung eines Fusions-Proteins führt, welches den katalytisch aktiven Teil der Anaplastischen Lymphoma Kinase (ALK) enthält. Diese Fusion resultiert in der dauerhaften Aktivierung von ALK, was in weiterer Folge die maligne Transformation von Zellen in dieser Krebsart antreibt.
In den letzten Jahren wurde ein bedeutender Einfluss des mit dem Tumor assoziierten Stromas auf Krebsentwicklung und –verlauf festgestellt. Die Interaktion zwischen Tumorzellen und stromalen Zellen stellt daher einen neuen Ansatz für Behandlung von Neoplasien dar.
Das Ziel dieses Projekts war die Etablierung eines in vitro Systems für die Untersuchung von Tumor-Stroma Interaktionen in ALK positiven ALCLs. Ein Mausmodell, welches das NPM-ALK Transgen unter der Kontrolle des T-Zell spezifischen CD4 Promoters trägt, wurde dazu herangezogen. Zusätzlich wurde ein Cre/Lox System genutzt, das den konditionellen knock-out der AP-1 Trankriptionsfaktoren JUN und JUNB ermöglicht. Diesen Genen wird eine wichtige Rolle in der Entwicklung von ALCLs zugeschrieben.
Es wurden Isolationsmethoden für tumorgene T-Zellen und stromale Zellen von Maus-Lymphom-Geweben etabliert und ein Co-Kultur System entwickelt. Dieses System wurde zur Verifizierung eines möglichen unterstützenden Effekts von stromalen Zellen auf die Viabilität von Tumorzellen herangezogen. Zusätzlich wurde das Co-Kultur System genutzt um CD4-NPM-ALK Tumorzellen, welchen JUN und JUNB fehlt, in vitro zu kultivieren. Um Experimente mit JUN/JUNB knock-out Zellen zu vereinfachen, wurde ein System zur Entfernung von JUN und JUNB in vitro entwickelt. Letzlich wurde die
SDF-1/CXCR4 Achse als ein potentieller Weg der Interaktion von stromalen und Tumorzellen identifiziert. |
| Abstract in Englisch: | Systemic anaplastic large cell lymphoma (ALCL) is a highly aggressive non-Hodgkin lymphoma preferentially found in children and young adults. In more than half of all cases a chromosomal translocation can be found that results in the expression of a fusion protein containing the catalytically active portion of the anaplastic lymphoma kinase (ALK). This leads to continuous activity of ALK which is the driving force of the malignant transformation of cells in this cancer.
In recent years tumor associated stroma for cancer development and progression came into focus of cancer research. The interaction between tumor cells and their surrounding stroma therefore represents a new approach for cancer treatment.
The aim of this project was to set up an in vitro system for investigation of tumor-stroma interactions in ALK positive ALCLs. A mouse model carrying the NPM-ALK transgene under the T-cell specific CD4 promoter was used. Additionally, a Cre/lox system for the conditional knockout of the AP-1 transcription factors JUN and JUNB in T-cells was available. These genes have been found to play an important role in ALCL tumor progression.
After the establishment of isolation methods for tumor T-cells and stromal cells derived from the mouse lymphoma tissue a co-culture system for those cells was set up. This system was used to verify the supporting effect of stromal cells on tumor cell viability. Furthermore, the co-culture system was used to successfully culture CD4-NPM-ALK tumor cells lacking JUN and JUNB in vitro. A method for in vitro deletion of JUN and JUNB in CD4 NPM-ALK cell lines was developed for facilitation of experiments using JUN/JUNB knockout cells. Finally, the SDF-1/CXCR4 axis was identified as a potential way of interaction of stromal and tumor cells in this model system.
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| Schlagworte |
| Schlagwörter Deutsch: | ALCL, c-Jun, JunB |
| Schlagwörter Englisch: | ALCL, c-Jun, JunB |
| Sonstiges |
| Signatur: | D-17481 |
| Organisationseinheit, auf der die Arbeit eingereicht wird: | H94100 Institut für Angewandte Genetik und Zellbiologie (IAGZ) |
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